QuickCut快速限制性内切酶DpnI-常用生化试剂-试剂-生物在线
北京索莱宝科技有限公司
QuickCut快速限制性内切酶DpnI

QuickCut快速限制性内切酶DpnI

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产品名称: QuickCut快速限制性内切酶DpnI

英文名称:

产品编号: Q2040-50Rxns

产品价格: 0

产品产地: 中国 北京索莱宝

品牌商标: solarbio

更新时间: 2025-02-05T13:46:23

使用范围: null

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快速内切酶 DpnI

货号:Q2040规格:50T

保存-20℃保存,有效期 2 年。

 

5...G Am6  T C...3

3...C T Am6 G...5

 

 

同裂酶: MalI

注:同裂酶对于不同的甲基化修饰也许具有不同敏感性。

产品组成


组分

50T

Storage

快速内切酶 DpnI

50 μl

-20

10× Reaction Buffer

1 ml

-20

10× Reaction Color Buffer

1 ml

-20

 

产品说明:

快速内切酶是一系列经过基因工程重组、能够在 5~15  分钟内精确完成 DNA 切割的限制性内切酶,适用于质粒 DNAPCR 产物或基因组 DNA 等的快速酶切。快速内切酶快速内切酶具有如下特点:5~15 分钟内即可完成酶切;共用一种酶切 Buffer,大大简化酶切反应体系;良好的酶活冗余度,轻松应对底物过量或困难模板酶切。此外,去磷酸化、连接试剂在 Reaction 酶切 Buffer 中具有 100% 活性,支持一管化反应,提升“酶切—修饰—连接”的体验。

建议反应条件:1× Reaction  缓冲液;37温育;参照“DNA 快速酶切流程配制反应体系。

失活条件80温育 20 min

产品应用:

1. DNA 快速酶切流程

冰上按照下表配制反应体系:

 

质粒 DNA

PCR 产物

基因组 DNA

ddH2O

15μl

16μl

30μl

10×Reaction Buffer 10×Reaction Colo Buffer

2μl

3 μla

5μl

底物 DNA

2 μl (up to 1 μg)

10 μl (~0.2 μg)

10 μl (5 μg)

快速内切酶 DpnI

1μl

1μl

5μl

Total

20μl

30μl

50μl

a.  本体系适用于经过纯化的  PCR  产物酶切未纯化的  PCR  产物具备一定的离子强10× Reaction Buffer加入量可适当减少至  2μl。但由于  DNA  聚合酶同时具有外切酶活性,会影响酶切产物,因此如下一步需进行克隆等操作,建议酶切前对  PCR 产物进行纯化。

轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴;


37温育 15 min(质粒), 15~30 minPCR 产物),或 30~60 min基因组 DNA);

80温育 20 min  即可使酶失活,停止反应(可选)。

2. 双酶切或多酶切

每种快速内切酶的用量为 1 μl,并根据需要适当扩大反应体系;

所有快速内切酶的体积总和不得超过总反应体系的 1/10

如果所用的几种快速内切酶的最适反应温度不同,应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度较高的酶,在其最适反应温度下进行酶切反应。

 3.  适用于质粒的扩大反应体系

 

DNA

1 μg

2 μg

3 μg

4 μg

5 μg

快速内切酶 DpnI

1μl

2μl

3μl

4μl

5μl

10× Reaction Buffer 10× Reaction Colo Buffer

2μl

2μl

3μl

4μl

5μl

Total

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